Impacto de la clindamicina in vitro en la combinación clindamicina-ketoconazol sobre el exopolímero de biopelículas de Candida spp de origen urogenital

Resumo

Introducción: La mucosa vaginal ha sido utilizada largamente para la administración de antimicrobianos destinados al tratamiento de infecciones endógenas del tracto genital inferior (IETGI) en mujeres embarazadas y no embarazadas. Candida spp elabora biopelículas (BP) y su formación es un proceso complejo que requiere que las células fúngicas establezcan múltiples interacciones con el medio. Las BP están rodeadas por un exopolímero (EPM) que puede restringir la actividad de anticuerpos, la difusión de sustancias y unirse a los antimicrobianos (AM), limitando su acción. Los antimicrobianos (AM) en general y los antimicóticos en particular (AMC) pueden tener dificultades para llegar a las células dentro del EPS. Muchas de las fórmulas que se emplean para el tratamiento empírico usan combinaciones inapropiadas con limitada o nula actividad sobre las biopelículas (BP). La presencia de moléculas que provoquen su inhibición anulando los inductores del EPM o por otro mecanismo, permitirá la actividad del AM específico. Objetivo: demostrar que la actividad de la clindamicina (CLI) en fórmula dual con ketoconazol (KET) actúa sobre BP Candida albicans (CA) y especies no albicans de Candida. (NAC). Métodos: estudiamos la actividad de clindamicina-ketoconazol (CK) sobre la adherencia y dispersión de BP de 8 aislamientos vaginales de CA y 7 de CNA. Se inocularon en 3 tubos con caldo Sabouraud y un dispositivo de vidrio para la formación de la BP según técnica ya descrita. Adherencia: Se incubaron durante 6 horas y se agregó una combinación de CK proveniente del material de óvulos, diluido convenientemente (62,5/260,4 ug/ml), a uno de los tubos de cada aislamiento tomándose como hora 0. Dispersión: esa misma dilución se agregó a otro tubo a las 16 horas. El tercer tubo quedó como testigo sin antimicrobianos. La lectura se efectuó con microscopio óptico a las 24 horas de agregada la combinación CK previa tinción con cristal violeta y se evaluaron con programas fotográficos. Por separado analizamos la actividad de CLI (62,5 ug/ml) y KET (260,4 ug/ml) con técnica similar. Seleccionamos las muestras de 7 pacientes que demostraron candidiasis vulvovaginal (CVV) y las estudiamos con la técnica de capas celulares. Se empleó la combinacion CK para el estudio de la adherencia y dispersión. Resultados: Adherencia se demostró poca influencia de CK en la adherencia con respecto a cada testigo. Dispersión: la influencia de CK se demostró en la mayoría de los aislamientos particularmente en los de CNA que mostraron una mayor presencia de EPM. Las hifas solo se observaron en 1/15 de los aislamientos de Candida spp cuando se agregó CK a las 16 horas. En las BP de las muestras clínicas no aparecieron hifas ni otro elemento micótico en 5/7 con respecto a los testigos. Conclusión: Según estos resultados el uso de una combinación de CK en BP de Candida spp, resulta en una adecuada penetración del AMC demostrada por la dispersión de la BP al cabo de 24 horas. Clindamicina no interfiere con la acción del ketoconazol sino que promovería su actividad anti-candida modificando posiblemente estructuras de superficie y la del EP por inhibición de las moléculas que facilitan la expresión del mismo. In vivo promueve la actividad inmunomoduladora que no se puede demostrar con este modelo in vitro. Su uso combinado en fórmulas duales facilitaría la actividad del AMC sobre Candida spp actuando como inhibidora o modificadora de las BP mediante la dispersión del EPM